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                改良 HE(蘇木素-伊紅)染色試劑盒說明書

                發布時間:2021/6/2 點擊量:833
                改良 HE(蘇木素-伊紅)染色試劑盒
                規格4×10ml/4×100ml
                產品內容         1121-10         1121-100
                蘇木素染液           10ml             100ml
                分化液               10ml             100ml
                返藍液               10ml             100ml
                伊紅染液              10ml            100ml
                注意:環境溫度低時,返藍液可能會有結晶析出,將分化液 37℃水浴融化 10min 后,吸取上清即可。
                產品說明
                蘇木精-伊紅染色法 ( Hematoxylin-Eosin staining ),簡稱 HE 染色法,是病理學常規制片中基
                本的染色方法。蘇木精染液為堿性染料,主要使嗜堿性物質如細胞核內的染色質與胞質內的核糖體
                著紫藍色;伊紅為酸性染料,主要使嗜酸性的細胞質和細胞外基質中的成分著紅色。
                染色過程需要根據具體實驗樣本進行優化,著色情況的不同與組織或細胞的種類不同有關,也
                隨其生活周期及病理變化而改變。例如,很多細胞在新生時期胞漿對伊紅著色較淡或輕度嗜堿,當
                其衰老時或發生退行性變則呈現嗜伊紅濃染。膠原纖維在老化和出現透明變性時,伊紅著色由淺變
                深。本產品所包含試劑均為工作液,可直接使用。新型試劑盒相比常規的,伊紅和蘇木素著色時間
                更短,顏色對比更鮮亮。
                操作說明(以下步驟僅供參考):
                (一)石蠟組織切片染色
                1、取材組織塊,經固定后,常規石蠟包埋,切片。
                2、石蠟切片脫蠟水化:
                1
                二甲苯(Ⅰ)脫蠟 10 min。
                2
                二甲苯(Ⅱ)脫蠟 10 min。
                3
                無水乙醇(Ⅰ) 2 min。
                4
                無水乙醇(Ⅱ) 2 min。
                5
                95%乙醇 2 min。
                6
                80%乙醇 2 min。
                7
                70%乙醇 2 min。
                8
                蒸餾水 2 min。
                3、蘇木素染液染色 3-10min(具體時間根據染色結果和實驗要求調整),自來水沖洗 5-10s。
                4、分化液分化 1-5s,自來水沖洗 20-30s,洗掉分化液即可。
                5、返藍液返藍 10s-1min,自來水沖洗 20-30s,洗掉返藍液即可。
                6、伊紅染色 30s-2min(具體時間根據染色結果和實驗要求調整),自來水沖洗 1-5s。
                7、脫水、透明、封片。
                ①80%乙醇(Ⅰ) 2-3s
                產品內容
                1121-10
                1121-100
                蘇木素染液 10ml 100ml
                分化液 10ml 100ml
                返藍液 10ml 100ml
                伊紅染液 10ml 100ml2頁,共 2
                ②90%乙醇(Ⅱ) 2-3s
                ③95%乙醇(Ⅰ) 2-3s
                ④95%乙醇(Ⅱ) 2-3s
                ⑤無水乙醇(Ⅰ) 2-3s
                ⑥無水乙醇(Ⅱ) 1min
                ⑦二甲苯(Ⅰ) 1min
                ⑧二甲苯(Ⅱ) 1min
                ⑨中性樹膠封固,鏡下觀察。
                (二)冰凍切片或細胞染色
                1. 冰凍切片恢復室溫后直接固定 3-5min,水洗 3-5min。
                2. 蘇木素染色 1-2min。
                3. 分化液分化 10s,水洗 1-2min。
                4. 返藍液反藍 2-5min,水洗 1-2min。
                5. 伊紅染色 30s-2min,自來水稍洗。
                6. 脫水,透明,封片:
                1
                95%乙醇(Ⅰ) 2-3s。
                2
                95%乙醇(Ⅱ) 2-3s。
                3
                100%乙醇(Ⅰ)2-3s。
                4
                100%乙醇(Ⅱ)1min。
                5
                二甲苯(Ⅰ) 1min。
                6
                二甲苯(Ⅱ) 1min。
                7
                中性樹膠封固,鏡下觀察。
                染色結果:
                細胞核呈藍色;細胞質、纖維呈紅色。
                注意事項:
                1. 切片脫蠟應盡量干凈。
                2. 系列乙醇應經常更換新液。
                3. 第一次使用本試劑盒時建議先取 1-2 個樣品做預實驗。
                4. 染色過程推薦淺染,通常只需能夠分辨細胞核即可,顏色過深有可能影響細胞質顏色。
                5. 分化液的分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和鹽酸乙醇分化液的新舊而定,另外分化后
                自來水沖洗時間應該足夠,以便*清洗酸。
                6. 冷凍切片染色時間盡量要短。
                7. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
                 

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